pululanasa

La pululanasa es una enzima desramificante-almidón-inducible por maltosa de Klebsiella pneumoniae. La secreción depende de productos de al menos ocho genes de secreción que se encuentran a ambos lados del gen de la pululanasa (pulA) en el cromosoma de Klebsiella (Kornacker y Pugsley, 1990b). La pululanasa puede expresarse y secretarse en E. coli siempre que se expresen simultáneamente los genes de secreción de pululanasa (d'Enfert et al., 1987). La proteína existe como un intermediario expuesto, unido a la superficie celular, antes de ser liberada al medio al inicio de la fase de crecimiento estacionario (Michaelis et al., 1985). La información de exportación y secreción parece residir en la mitad N-terminal de la pululanasa (Kornacker y Pugsley, 1990a). Se demostró que las proteínas híbridas en las que la región C-terminal de la pululanasa había sido reemplazada por la -lactamasa madura y la fosfatasa alcalina (PhoA), respectivamente, fusionadas a los primeros 832 N-aa de la pululanasa, estaban ancladas transitoriamente en la superficie- cuando se expresaban junto con los genes de secreción de pululanasa en E. coli (Kornacker). y Pugsley, 1990b). Aunque ambas enzimas se exhibieron en la superficie, PhoA estuvo expuesta de manera menos eficiente, lo que podría deberse a estructuras secundarias y terciarias incompatibles de la proteína pasajera heteróloga.